猪流感病毒（H1  亚型）ELISA  抗体检 测试剂盒说明书

【兽药名称】

通 用 名 ：猪流感病毒（H1 亚型）ELISA 抗体检测试剂盒

商 品 名 ：无

英 文 名 ：ELISA Kit for Swine Influenza Virus（H1 Subtype）Antibody Detection

汉语拼音 ：Zhuliuganbingdu (H1 Yaxing) ELISA Kangtijiance Shijihe

【主要成分与含量】

组分含量

（1）抗原包被板2 板

（2）阳性对照2 管（2ml/管）

（3）阴性对照2 管（2ml/管）

（4）酶标记物1 瓶（20ml/瓶）

（5）20 倍浓缩洗涤液1 瓶（50ml/瓶）

（6）样品稀释液1 瓶（50ml/瓶）

（7）底物液 A 1 瓶（10ml/瓶）

（8）底物液 B 1 瓶（10ml/瓶）

（9）终止液1 瓶（10ml/瓶）

（10）血清稀释板2 板

（11）说明书1 份

【作用与用途】 用于检测 H1 亚型猪流感病毒血清抗体。

【注意事项】

（1）实验前，将试剂盒所有 组分取出置温箱（25℃±3 ）回温至少30 分钟 ，实验完成回后放回 2 ～8℃ 保存。

（2）若试剂盒阴阳性对照、酶标记物出现少量悬浮物，属正常现象。

（3）请在试剂盒规定的有效期内使用；禁止非同批试剂盒混用。

（4）没有用完的抗原包被板应贮存在密封塑料袋内，于 2～8℃存放。

（5）避免底物液 B 暴露于强光，避免接触氧化剂。

（6）先使用血清稀释板稀释完所有的待检血清，再将稀释好的血清转移到抗原包被板上，使反应时间一致。

（7）浓缩洗涤液用蒸馏水或纯水稀释，如果发现有结晶加热使其溶解后再使用。

（8）严格按照操作程序，仔细的吸液、计时，充分洗涤，对于获得精确的结果是非常必要的。

兽用非处方药

【用法与判定】

1 用法

1.1 样品准备 取动物全血，待血液凝固后，以 4000r/min 离心 10 分钟，收集血清。

或待血液凝固后自然析出血清。血清应清亮，无溶血。

1.2 洗涤液配制 使用前，将 20 倍浓缩洗涤液用蒸馏水或纯水作 20 倍稀释（例如：

10ml 的浓缩洗涤液加 190ml 纯水），混匀，置 2～8℃可保存 7 日。

1.3 待检血清的稀释 将待检血清在血清稀释板中用样品稀释液按 1:40 稀释（例如：

195μl 样品稀释液中加 5μl 待检血清）。

1.4 对照不需要稀释，直接使用。

1.5 操作步骤

1.5.1 取抗原包被板（根据样品多少，可拆开分次使用），每孔加入稀释好的洗涤液

300μl，无需静置，甩掉板孔中的洗涤液，洗涤 1 次，在吸水材料上拍干。

1.5.2 将稀释好的待检血清和阴、阳性对照各取 100μl 加入到抗原包被板孔中，待检血

清设 1 孔，阴性对照、阳性对照各设 2 孔，置 37℃温育 30 分钟。

1.5.3 甩掉板孔中的液体，每孔加入稀释好的洗涤液 300μl，无需静置，甩掉板孔中的

洗涤液，共计洗涤 5 次，最后一次在吸水材料上拍干。

1.5.4 每孔加入酶标记物 100μl，置 37℃温育 30 分钟。

1.5.5 洗涤 5 次，方法同 1.5.3。

1.5.6 每孔先加入底物液 A50µl，再加入底物液 B 50µl，轻微振动反应板混匀，置室温

（20~25℃）避光显色 10 分钟（ （ 特别注意 ：将 不能将 A 、B 液 液 混合 后 加入反应孔 ， 否则结果不

准确） ）。

1.5.6 每孔加入终止液 50µl，10 分钟内在酶标仪上测定各孔 OD 630nm 值。

2 判定

2.1 成立条件 阳性对照 OD 630nm 平均值应≥0.6；阴性对照 OD 630nm 平均值应＜0.3。

2.2 判定标准 S 为样品 OD 630nm 值，P 为阳性对照 OD 630nm 平均值，计算 S/P 值。

S/P =样品 OD 630nm 值/阳性对照 OD 630nm 值平均值

如果 S/P≥0.25，判为阳性；如果 S/P＜0.25，则判为阴性。

【规 格】 192 孔/盒

【贮藏与有效期】 2～8℃保存，有效期为 10 个月