2022年8月18日
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名称:
 
   
   
   
 
  产品名称: 牛结核病γ-干扰素 ELISA 检测试剂盒
  产品编号:
  产品规格: 192 孔/盒
     
 
特效与功效:
 
牛结核病γ γ- 干扰素 ELISA  检测试剂盒说明书
【兽 用 名称】
通 用 名 :牛结核病γ-干扰素 ELISA 检测试剂盒
商 品 名 :无
英 文 名: Bovine Tuberculosis IFN-γ ELISATest Kit
汉语拼音 :Niujiehebing γ-ganraosu ELISA Jiance Shijihe
【主要组分与含量】
组分 含量 组分 含量
抗原包被板 2 板 酶标记物 1 瓶(20ml/瓶)
牛结核菌素 1 管(1.2ml /管) 20 倍浓缩洗涤液 1 瓶(50ml/瓶)
禽结核菌素 1 管(1.2ml /管) 底物液 A 1 瓶(10ml/瓶)
阳性对照 1 管(1ml/管) 底物液 B 1 瓶(10ml/瓶)
阴性对照 1 管(1ml/管) 终止液 1 瓶(10ml/瓶)
兔抗牛γ-干扰素多克隆抗体 1 瓶(20ml/瓶) 说明书 1 份
无菌 PBS 1 瓶(20ml/瓶)
【 作用与用途 】 用于牛结核病的辅助诊断。
【 注意事项】
( (1) ) 实验 前 , 将 试剂盒所有 组分 取 出 置 温箱( (25℃±3) )少 回温至少 30  分钟 ,回 实验完成后放回 2 ~8℃保 保
存。
(2)若试剂盒阴阳性对照、酶标记物出现少量悬浮物,属正常现象。
(3)请在试剂盒规定的有效期内使用;禁止非同批试剂盒混用。
(4)没有用完的抗原包被板应贮存在密封塑料袋内,于 2~8℃存放。
(5)避免底物液 B 暴露于强光,避免接触氧化剂。
(6)浓缩洗涤液用蒸馏水或纯水稀释,如果发现有结晶加热使其溶解后再使用。
(7)严格按照操作程序,仔细的吸液、计时,充分洗涤,对于获得精确的结果是非常必要的。
【用法与判定】
1 用法
1.1 样本制备 待检样本按如下方法制备:
1.1.1 采血 无菌采集牛全血 5ml,肝素钠抗凝,室温条件下 36 小时内送达实验室进行刺激培养。
培养试验开始前准备无菌清洁的 2ml 平底离心管和无菌 PBS。
1.1.2 血液分装 分装前应将装有抗凝血的采血管上下轻轻颠倒 5~10 次,充分混匀血液样本。将
每份抗凝血加入 3 个 2ml 离心管中,1ml/管。
1.1.3 结核菌素工作液配制 按每个样本所需 100μl 结核菌素工作液( ( 临用前 按 无菌 操作 配制) ),将
牛结核菌素(bPPD)和禽结核菌素(aPPD)作 5 倍稀释(例如:20μl 结核菌素与 80μl 无菌 PBS 混合)。
1.1.4 抗原刺激 将牛结核菌素(bPPD)、禽结核菌素(aPPD)工作液(2 种刺激抗原)和 PBS(无
刺激抗原对照)按无菌操作各取 100μl 依次加入 1.2 项中的 3 支离心管中。盖严,轻轻摇动离心管,使血
液与刺激抗原或 PBS 充分混合,置 37℃培养 16~20 小时,获得 2 种抗原刺激的血液培养上清和 PBS 血
液培养上清,如果上清不足 100μl,可 2000 转/min 离心 5 分钟。
兽用非处方药
1.1.5 样本贮存 如果不立即检测上述血液培养上清,可收集后低温保存,检测时先将样本恢复至
室温。上清在 2~8℃可保存 7 日,在-20℃以下可保存 3 个月。
1.2 洗涤液配制 使用前,将 20 倍浓缩洗涤液用蒸馏水或纯水作 20 倍稀释(例如:10ml 的浓缩洗
涤液加上 190ml 纯水),混匀。置 2~8℃保存,可保存 7 日。
1.3 操作步骤
1.3.1 取出抗原包被板,平衡至室温(根据样本多少,可拆开分次使用),按样本布局表加入刺激后
的血液培养上清样本,100μl/孔;同时设阳性对照(PC)、阴性对照(NC)各 2 孔(阴阳性对照不稀释),
100μl/孔,置 37℃温育 45 分钟。
1.3.2 甩掉板孔中的液体,每孔加入稀释好的洗涤液 300µl,无需静置,甩掉板孔中的洗涤液,重复
洗涤共计 3 次,最后一次在吸水材料上拍干。
1.3.3 每孔加入兔抗牛γ-干扰素多克隆抗体 100μl,置 37℃温育 30 分钟。
1.3.4 洗板 3 次,方法同 1.3.2。
1.3.5 每孔加入酶标记物 100μl,置 37℃温育 30 分钟。
1.3.6 洗板 5 次,方法同 1.3.2。
1.3.7 每孔先加入底物液 A 50µl,再加入底物液 B 50µl,混匀,置室温(20~25℃)避光显色 10 分
钟。
1.3.8 每孔加入终止液 50µl,10 分钟内,在酶标仪上测定各孔 OD 630nm 值。
2 判定
2.1 成立条件 阳性对照(PC)OD 630nm 平均值≥1.0,阴性对照(NC)OD 630nm 平均值<0.3。
2.2 判定标准 bPPD 血液培养上清孔 OD 630nm 值记作 OD bPPD ,aPPD 血液培养上清孔 OD 630nm 值记
作 OD aPPD ,PBS 血液培养上清孔 OD 630nm 值记作 OD PBS ,计算 OD bPPD 、OD aPPD 及 OD PBS 之间的差值。
OD bPPD -OD PBS ≥0.2 且 OD bPPD -OD aPPD ≥0.2 判为牛结核病阳性;其它情形均判为牛结核病阴性。
【规 格】 192 孔/盒
【贮藏与有效期】 2~8℃保存,有效期为 10 个月
 
 
   
 
 

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