禽白血病抗原 ELISA检测试剂盒使用说明书

【兽用名称】

通 用 名 ：禽白血病抗原 ELISA 检测试剂盒

商 品 名 ：无

英 文 名 ：Avian Leukosis VirusAntigen ELISATest Kit

汉语拼音 ：Qinbaixuebing Kangyuan ELISAjiance Shijihe

【 主要组分与含量 】

组分 含量

（1）单抗包被板 2 板

（2）阳性对照 1 管（2ml/管）

（3）阴性对照 1 管（2ml/管）

（4）酶标记物 1 瓶（20ml/瓶）

（5）20 倍浓缩洗涤液 1 瓶（50ml/瓶）

（6）样品稀释液 1 瓶（50ml/瓶）

（7）底物液 A 1 瓶（10ml/瓶）

（8）底物液 B 1 瓶（10ml/瓶）

（9）终止液 1 瓶（10ml/瓶）

（10）稀释板 2 板

（11）说明书 1 份

【 作用与用途 】 用于鸡的泄殖腔拭子、卵清、组织样品及细胞培养物中禽白血病病毒 P27

抗原的检测。

【 注意事项 】

（ （1） ） 实 验 前，将 试剂盒所有 组分 取 出 置 温箱（ （25℃±3 ）回温至少 30  分钟 ，实验完成

回 后放回 2 ～8℃ 保存。

（2）若试剂盒阴阳性对照、酶标记物出现少量悬浮物，属正常现象。

（3）请在试剂盒规定的有效期内使用；禁止非同批试剂盒混用。

（4）没有用完的单抗包被板应贮存在密封塑料袋内，于 2～8℃存放。

（5）避免底物液 B 暴露于强光，避免接触氧化剂。

（6）浓缩洗涤液用蒸馏水或纯水稀释，如果发现有结晶加热使其溶解后再使用。

（7）严格按照操作程序，仔细的吸液、计时，充分洗涤，对于获得精确的结果是非常

必要的。

【 用法与判定 】

1 用法

兽用非处方药

1.1 样品准备

卵清 收集稀卵清，无需稀释直接作为样品进行检测。如果卵清较粘稠，可反复冻融

降低其粘稠度。

对照 无需稀释直接 使用。

泄殖腔拭子 将泄殖腔拭子放入含有 0.5ml 样品稀释液中冷冻。检测前，将样品恢复至

室温，5000r/min 离心 2 分钟。吸取 100μl 上清，进行检测。

组织样品 取 0.5g 组织病料于研磨器剧中，加入 0.5ml 样品稀释液研磨匀浆，将组织

悬液转移至无菌离心管中，5000r/min 离心 2 分钟，吸取 100μl 上清，进行检测。

细胞培养物 将细胞培养物反复冻融两次。检测前，将样品恢复至室温，5000r/min 离

心 2 分钟。吸取 100μl 上清，进行检测。

1.2 洗涤液配制 使用前，将 20 倍浓缩洗涤液用蒸馏水或纯水作 20 倍稀释（例如：

10ml 的浓缩洗涤液加 190ml 纯水），混匀，置 2～8℃可保存 7 日。

1.3 操作步骤

1.3.1 取抗原包被板（根据样品多少，可拆开分次使用），每孔加入稀释好的洗涤液 300μl，

无需静置，甩掉孔中的洗涤液，共计洗涤 2 次，在吸水材料上拍干。

1.3.2 将待检样品、阴性对照和阳性对照各取 100μl 加入到包被板中，待检样品设 1 孔，

阴、阳性对照各设 2 孔，置室温（20～25℃）反应 60 分钟。

1.3.3 甩掉板孔中的液体，每孔加入稀释好的洗涤液 300μl，无需静置，甩掉板孔中的

洗涤液，共计洗涤 5 次，最后一次在吸水材料上拍干。

1.3.4 每孔入加酶标记物 100μl，置室温（20～25℃）反应 60 分钟。

1.3.5 洗涤 5 次，方法同 1.3.3

1.3.6 每孔先加入底物液 A 50µl，再加入底物液 B 50µl，轻微振动反应板混匀，室温

（20~25℃）避光显色 10 分钟（ （ 特别注意 ：将 不能将 A 、B 液 液 混合 后 加入反应孔 ， 否则结果不

准确） ）。

1.3.7 每孔加入终止液 50µl，10 分钟内在酶标仪上测定各孔 OD 630nm 值。

2 判定

2.1 试验成立条件 阳性对照 OD 630nm 平均值应≥0.5，阴性对照 OD 630nm 平均值应＜0.2。

2.2 判定标准 S 为样品 OD 630nm 值，P 为阳性对照 OD 630nm 平均值，计算 S/P 值。

S/P =

样品 OD 630nm 值

阳性对照 OD 630nm 值平均值

如果 S/P＞0.2，判为阳性；如果 S/P≤0.2，则判为阴性

【 规 格 】 192 孔/盒

【 贮藏与有效期 】 2～8℃保存，有效期为 12 个月