2020年4月1日
|
|
|
|
|
|
|
名称:
 
   
   
   
 
  产品名称: 猪乙型脑炎病毒(JEV)ELISA抗体检测试剂盒
  产品编号:
  产品规格: 5块版
     
 
特效与功效:
 
 

猪乙型脑炎病毒(JEV)ELISA抗体检测试剂盒说明书


 

 

 

兽药名称

通用名称猪乙型脑炎病毒JEVELISA抗体检测试剂盒 商品名称

 

英文名称Swine Japanese Encephalitis VirusJEVAb ELISA kit

 

汉语拼音Zhu Yixingnaoyan Bingdu ELISA kangti Jiance

 

作用与用途

日本乙型脑炎病毒JEV为黄病毒科黄病毒属成员是一 种可通过库蚊传播、造成人畜共患的病毒其感染人可引起脑 感染猪只会造成生殖系统疾病如流产、死胎等。在流行该 病的地区该病毒在自然界中主要在蚊虫、家禽、野鸟、猪和人 类中循环传播。猪是该病毒最主要的增殖宿主和传染源。本试 剂盒可用于监测猪血清中的JEV特异性抗体其检测结果可作 为评价病毒感染或者疫苗免疫水平的依据。

 

主要组份与含量

猪乙型脑炎病毒抗原包被板

2块板

5块板

样品稀释液

60mL×1

180mL×1

10倍洗涤液

125mL×1

240mL×1

JEV HRP标记抗体

30mL×1

70mL×1

TMB底物液

30mL×1

70mL×1

终止液

20mL×1

40mL×1

阳性对照血清

3mL×1

7mL×1

阴性对照血清

3mL×1

7mL×1

封板膜

2

5

说明书

1

1

注意事项

1 试剂盒储存条件为2-8℃。开启前应确认其批号及有效期。

2 过期产品请勿使用不同批号的试剂盒组份禁止混用。

3 试剂盒使用前各组份试剂均需恢复至室温25±3),使用 后放置2-8℃保存。

4 应注意避免向试剂盒中引入污染。

5 实验所用仪器微量移液器恒温培养箱ELISA洗板机 酶标仪需要在使用前进行功能检查确保其可用性、准确 性。

6 所有试剂严禁接触皮肤和粘膜。检测结束后所用耗材需按 国家规定进行无害化处理。

7 移液器吸头必须一次一换。


8 未用的微孔板条可装入密封袋中2-8℃保存。

9 试剂盒中各组份容器只针对该组份使用不可二次利用。

10) 仅供兽医诊断使用。

 

 用法与判定

1、试剂准备

1) 所有试剂恢复至室温25±3后使用。

2) 1倍洗涤液的配制

10倍洗涤液使用超纯水进行10倍稀释稀释后的洗涤液 2-8℃可以稳定保存1周。如配制100mL 1倍洗涤液需

10mL 10倍洗涤液加90mL超纯水dH2O

2、样品标准

1) 尽量使用新鲜采集的血清样本。

2) 不能用于严重污染或严重溶血样本的检测。

3) 如果血清样本浑浊需离心后取上清进行检测。

4) 检测样品可在2-8℃保存5长时间保存需要转移至 -20℃或更低温环境中。

3、样品稀释 样品采用2步法100倍稀释。第一步10倍稀释样品稀释板中 每孔加入90μL样品稀释液然后每孔加入10μL血清样品 分混匀第二步再次10倍稀释稀释板中每孔加入135μL样品 稀释液然后每孔加入15μL第一步混匀后的样品充分混匀。

禁止稀释阳性对照血清PC与阴性对照血清NC

 4、操作步骤

1)      将所有组份从试剂盒中取出在恒温箱25±3中放 置至少60分钟恢复至室温。

2)      向抗原包被板孔中加入100μL提前在稀释板中稀释后的 样品。

3)      向指定孔中分别加入100μL未稀释 的阴性对照血清 NC和阳性对照血清PC

4)      盖上封板膜室温25±3下孵育30分钟±2分钟

5)     ELISA洗板机或微量移液器洗板弃去孔中液体每孔 300μL1倍洗涤液洗涤三次。最后一次洗涤后将酶标 板在吸水纸上轻轻拍干严禁各步骤之间孔板出现干燥 情况。

6)      每孔加入100μL JEV HRP标记抗体。

7)      盖上封板膜室温25±3下孵育30分钟±2分钟

8)      重复步骤5

9)      每孔中加入100μL TMB底物液。

10)    盖上封板膜室温25±3下孵育15分钟±1分钟

11)    每孔中加入50μL终止液终止酶促反应。

12)  使用450nm波长测量吸光度值。

13)  结果判定与计算。

 

5、判定

 

1 实验成立条件 阳性对照OD450nm平均值0.4 阴性对照OD450nm平均值0.3

 

如果检测结果不在界定范围则需要重新进行检测。 2 计算方法

 

NC OD均值=

NC1+NC2

 

2

 

PC OD均值=

PC1+PC2

 

2

 

3 S/P值计算公式

 

S/P= 样品OD-NC OD均值

 

PC OD均值-NC OD均值

 

4 判定标准

 

阳性 阴性

S/P0.4 S/P0.4

 

11)    每孔中加入50μL终止液终止酶促反应。

 
 
   
 
 

广西南宁莱佛斯托生物科技有限公司 版权所有 技术支持:源码之家
地址:中国 南宁市高新区科园大道68号软件园二期(东盟慧谷)4号楼511室 邮编530007
电话:0771-3218969 传真:0771-3218969 桂ICP备11001744号