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产品名称: |
猪伪狂犬病毒gB (PRV gB)抗体ELISA检测试剂盒 |
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产品编号: |
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产品规格: |
480份 |
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特效与功效: |
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兽药名称
通用名称:猪伪狂犬病毒gB (PRV gB)抗体ELISA检测试剂盒
商品名称:无
英文名称: Pseudorabies Virus (PRV) gB Ab ELISAKit
汉语拼音: Zhu Weikuangquanbingdu gB Kangti ELISAJianceshjhe
作用与用途
猪伪狂犬病毒gB (PRV gB)抗体ELISA检测试剂盒可以检测猪血清中是否存在PRV gB抗体,检测结果与中和抗体符台率高,是一种准确、快速、简单的检测PRV gB抗体的方法。
主要组份与含量
猪伪狂犬病毒gB抗原包被板：5块板
样品稀释液：60mLX1
10倍洗涤液：240mLX1
PRV gB HRP标记抗体： 70mLX1
TMB底物液：70mLX1 .
终止液：40mLX1
阳性对照血清：3mLX1
阴性对照血清：3mLX1
封板膜：5张
注意事项
1) 试剂盒储存条件为2-8°C.开启前应确认其批号及有效期。
2)过期产 品请勿使用,不同批号的试剂盒组份禁止混用。
3)试剂盒使用前各组份试剂均需恢复至室温(25±3°C),使用后放回2-8℃。
4)应注意避免向试剂盒中引入污染。
5)实验所用仪器 (如:微量移液器,恒温培养箱, ELISA洗板机,酶标仪)需要在使用前进行功能检查,确保其可用性,准确性。
6)所有试剂严禁接触皮肤和粘膜。检测结束后所用耗材需按国家规定进行无害化处理。
7)移液器吸头必须一次一换。
8) 未用的微孔板条可装入密封袋中2-8℃保存。
9) 试剂盒中各组份容器只针对该组份使用,不可二次利用。
10)仅供兽医诊断使用。
用法与判定
1.试剂准备
1)所有试剂恢复 至室温(25±3°C)后使用。
2)1倍洗涤液的配制
10倍洗涤液用超纯水进行10倍稀释,稀释后的洗涤液在2-8℃可以稳定保存1周。如配制100mL 1倍洗涤液需10mL10倍洗涤液加90ml超纯水(dH:0)。
2、样品准备
1) 尽量使用新鲜采集的血清样本。
2)不能用于 检测严重污染或严重溶血的样本。
3)如果 血清样本浑浊,需离心后取上清进行检测。
4)检测样品可在2-8℃保存5天, 长时间保存需要转移至-20°C或更低温环境中。
3、样品稀释及阴阳性对照血清稀释
样品采用2倍稀释。按照下一页 “微孔板加样位置示例图”在稀释板中每孔加入70uL样品稀释液,各孔加入70μL血清样品。同样比例稀释阳性对照血清(PC)与阴性对照血清(NC),即:在稀释板A1. B1.C1. D1孔各加入70μL样品稀释液, A1. B1孔各加入70μL NC, C1、
D1孔各加入70μL PC,充分混匀。
4.操作步骤
1)将所有 组份从试剂盒中取出,在恒温箱(25±3°C)中放置至少60分钟，恢复至室温。
2)按照 “微孔板加样位置示例图”向抗原包被板指定孔中分别加入100μL稀释后的样品以及100μL稀释后阴性对照血清(NC).阳性对照血清(PC)。
3)盖 上封板膜,室温(25±3℃)下孵育1小时(±2分钟)。4)用ELISA洗板机或微量移液器洗板, 弃去孔中液体,每孔加300uL 1倍洗涤液,洗涤三次。最后- -次洗涤后将酶标板在吸水紙上轻轻拍干,严禁各步骤之间孔板出现干燥情况。5)每孔加入100uL PRV gB HRP标记抗体。
6)盖上封板膜, 室温(25±3°C)下孵育20分钟(±1分钟)。
7)重复步骤4)。
8)每孔中加入100uL TMB底物液。
9)盖上封板膜, 室温(25±3°C)下孵育15分钟(±1分钟)。
l0) 每孔中加入50μL终止液，终止酶促反应。
11) 使用450nm波长测量吸光度值。
12)结果判定与计算。
5、判定
1）实验成立条件
阳性对照OD450nm平均值>0.7;
阴性対照S/N值<0.3;
如果检测结果不在界定范围则需要重新进行检测。
2)计算方法
NC ODt1d=(NC1+NC2)/2
3)样品S/N值计算公式
S/N=祥品OD值/NC OD均值
4)判定标准
阳性：S/N<0.6
阴性：S/N>0.6
说明书：1 |
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