猪瘟病毒阻断 ELISA 抗体检测试剂盒说明书 【兽用名 称】 通 用 名 :猪瘟病毒阻断 ELISA 抗体检测试剂盒 商 品 名 :无 英 文 名 :Blocking ELISA Kit For Classical Swine Fever VirusAntibodies 汉语拼音 :Zhuwenbingdu Zuduan ELISA Kangtijiance Shijihe 【 主要组分与含量】 组分 含量 (1)抗原包被板 2 板 (2)阳性对照 1 管(1ml/管) (3)阴性对照 1 管(1ml/管) (4)酶标记物 1 瓶(20ml/瓶) (5)样品稀释液 1 瓶(50ml/瓶) (6)20 倍浓缩洗涤液 1 瓶(50ml/瓶) (7)底物显色液 1 瓶(20ml/瓶) (8)终止液 1 瓶(10ml/瓶) (9)血清稀释板 2 板 (10)封板膜 2 张 (11)说明书 1 份 【 作用与用途】 用于检测血清样品中的猪瘟病毒抗体。 【 注意事项】 ( (1) ) 实验 前,将 试剂盒所有 组分 取 出 置 温箱( (25℃±3 )回温至少 30 分钟 ,实验完成后 回 放回 2 ~8℃ 保存。 (2)若试剂盒阴阳性对照、酶标记物出现少量悬浮物,属正常现象。 (3)请在试剂盒规定的有效期内使用;禁止非同批试剂盒混用。 (4)没有用完的抗原包被板应贮存在密封塑料袋内,于 2~8℃存放。 (5)避免底物显色液暴露于强光,避免接触氧化剂。 (6)先使用血清稀释板稀释完所有的待检血清,再将稀释好的血清转移到抗原包被板上, 使反应时间一致。 (7)浓缩洗涤液用蒸馏水或纯水稀释,如果发现有结晶加热使其溶解后再使用。 (8)严格按照操作程序,仔细的吸液、计时,充分洗涤,对于获得精确的结果是非常必 要的。 兽用非处方药 【 用法与判定】 1 用法 1.1 样品准备 取动物全血,待血液凝固后,4000r/min 离心 10 分钟,收集上清。或 采集血液,待凝固后自然析出血清。血清应清亮,无溶血。 1.2 洗涤液配制 使用时,将 20 倍浓缩洗涤液用蒸馏水或纯水作 20 倍稀释(例如: 10ml 的浓缩洗涤液加上 190ml 纯水),混匀。置 2~8℃保存,可保存 7 日。 1.3 待检血清和对照的稀释 将待检血清和阴阳性对照在血清稀释板中按2倍稀释(例 如:60μl 样品稀释液中加 60μl 待检血清)。 1.4 操作步骤 1.4.1 取抗原包被板(根据样品多少,可拆开分次使用),每孔加入稀释好的洗涤液 300μl,无需静置,甩掉板孔中的洗涤液,重复洗涤共计 2 次,最后一次在吸水材料上拍干。 1.4.2 将稀释好的待检血清、阴性和阳性对照各取 100μl 加至抗原包被板中,待检血清 设 1 孔,阴、阳性对照各设 2 孔。轻轻振匀孔中样品(勿溢出),置 37℃温育 2 小时。 1.4.3 甩掉板孔中的液体,每孔加入稀释好的洗涤液 300μl,无需静置,甩掉板孔中的 洗涤液,重复洗涤共计 5 次,最后一次在吸水材料上拍干。 1.4.4 每孔加入酶标记物 100μl,置 37℃温育 30 分钟。 1.4.5 洗涤 5 次,方法同 1.4.3。 1.4.6 每孔加入底物显色液 100μl,置室温(20~25℃)避光显色 10 分钟。 1.4.7 每孔加入终止液 50µl,10 分钟内,在酶标仪上测定各孔 OD 630nm 值。 2 判定 2.1 成立条件 阴性对照 OD 630nm 平均值>0.50,阳性对照 OD 630nm 值的阻断率>50%。 2.2 判定标准 S 为样品 OD 630nm 值,N 为阴性对照 OD 630nm 平均值。 阻断率=(1-S/N)×100%
若被检样品的阻断率≥40%判为阳性; 若被检样品的阻断率≤30%判为阴性; 若被检样品的阻断率在 30%~40%之间判为可疑。 【 规 格】 192 孔/盒 【 贮藏与有效期】 2~8℃保存,有效期为 12 个月 |