口蹄疫O型（FMDV-O)抗体检测ELISA试剂盒
兽药名称
通用名称:口蹄疫O型（FMDV-O)抗体检测ELISA试剂盒
商品名称:无
英文名称: Foot and Mouth Disease Vius (FMDV) Type 0Ab ELISA Kit .
汉语拼音: Koutiyibingdu 0 Xing Kangti ELISA Jianceshjihe
作用与用途
口蹄疫(FMD) 是-种主要发生在猪、牛及其他偶蹄目动物的烈性传染病。口蹄疫病毒有7种主要血清型:0型、A型、C型、SAT-1. SAT-2、SAT-3以及亚洲I型。我国0型、A型病毒最为常见。
感染过口蹄疫病毒或免疫过口蹄疫疫苗的动物体内均会产生特异性中和抗体,中和表位在VP1蛋白的siteA(141-160)。通过ELISA方法检测FMDV结构蛋白抗体,不仅敏感性高.血清型特异性强，适用于大规模样本检测,而且还具有快速、易于操作、结果稳定的优点。
口蹄疫病毒(FMDV) 0型抗体ELISA检测试剂盒采用固相阻断ELISA方法,用于检测结构蛋白抗体。酶标板包被口蹄疫病毒0型抗原，如果待检样品中含有口蹄疫0型抗体,其与包被抗原结合后,将阻断HRP酶标记的0型单克隆抗体与包被抗原的结合，从而减少显色反应。本试剂盒适用于感染或免疫过的猪、牛、山羊、绵羊等各种动物的血清检测。
主要組分与含量
口蹄疫病毒O型抗原包被板：5快板
祥品稀釋液：100mLX1
10倍洗潦液：240mLX1
FMDV 0型HRP棕記抗体：70mLX1
TMB底物液：70mLX1
終止液：40mLX1
阻性対照血清：2mLX1
阴性対照l血清：2mLX1
封板膜：5張
説明书：1份
注意事项
1)储存条件为2-8C。试剂盒开启前应确认其批号及有效期。
2)过期产品请勿使用,不同批号的试剂盒组份禁止混用。
3)试剂盒 使用前各组份试剂均需恢复至室温(25土3°C) ,使用后放置2-8*C保存。
4)应注意避免向试剂盒中引入污染。
5) 实验所用仪器(如:微量移液器,恒温培养箱, ELISA洗板机，酶标仪)需要在使用前进行功能检查,确保其可用性、准确性。
6)所有试剂严禁接触皮肤和粘膜。检测结束后所用耗材需按国家规定进行无害化处理。
7) 移液器吸头必须一次一换。
8)未用的微孔板条可装入密封袋中2-8*C保存。
9) 试剂盒中各组份容器只针对该组份使用,不可二次利用。
10)仅供兽医诊断使用。
用法与判定
1.试剂准备
1)所有试剂恢复至室温 (25士3°C)后使用。
2)1倍洗涤液的配制
10倍洗涤液使用超纯水进行10倍稀释,稀释后的洗涤液在2-8°C可以稳定保存1周。如配制100mL 1倍洗涤液需10mL 10倍洗涤液加90ml超纯水(dH2O)。
2.样品准备
1)尽量使用新鲜采集的血清样品。
2)不能用于检测严重污染或严重溶血的样品。
3)如果血清样本浑浊,需离心后取上清进行检测。
4)检测样品可在2-8°C保存5天, 长时间保存需要转移至-20°C或更低温环境中。
3.样品稀释及阴、阳性对照血清稀释样品采用5倍稀释。按照下一页“微孔板加样位置示例图”在稀释板中加入120μL样品稀释液。各孔加入30μL血清样品。同样比例稀释阳性对照血清(PC)与阴性对照血清(NC),即:在稀释板A1、B1、C1. D1孔各加入120μL样品稀释液，A1、B1孔各加入30uL NC, C1、D1I孔各加入30uL PC,充分混勾。
4.操作歩驟
1)將所有 俎分从武剤盒中取出,在恒温箱(25土3C)中放置至少60分狆,恢夏至室温。
2)按照 “微孔板加祥位置示例囲"向抗原包被板指定孔中分別加入100uL稀釋后的祥品以及100uL稀后明性対照血清(NC)、阻性対照血清(PC}。
3) 盖上封板膜，室温(25土3*C)下孵育1小时（正负2分狆)
4) 用ELISA洗板机或微量移液器洗板，弃去孔中液体,毎孔加300uL 1倍洗滌液,洗条3次。最后- -次洗滌后將醇株板在吸水紙上軽経拍干,平禁各歩驟之囘孔板出現干燥情况。
5)毎孔加入100uL FMDV 0型HRP柝己抗体。
6) 盖上封板膜,室温(25士3C)下孵育1小吋仕2分中)。
7）重复歩驟4)。
8)毎孔中加入100uL TMB底物液。
六、读数：
每孔加入 50ul 终止液，在酶标仪 450nm 波长处读数。
七、结果判定：
1、实验有效性判定
阴性对照 OD 值≥0.7 阳性对照 OD 值≤0.3
如果判定结果不在界定范围则需要重新进行检测。
2、判定标准：
S/N 值的计算方程式： S/N=【样品值/阴性值】
S/N 值=0.50 判为阳性； S/N 值＞0.50 判为阴性；
注：如果检测结果可疑，对样品进行再次检测； |
