兽药名称
通用名称:口蹄疫3ABC抗体竞争ELISA检测试剂盒
商品名称:无
英文名称: Foot and Mouth Disease 3ABC Ab competitiveELISA Kit
汉语拼音: Koutiyibingdu 3ABC Kangti Jingzheng ELISAJianceshijihe
作用与用途
口蹄疫(FMD) 是一种主要发生在猪、牛及其他偶蹄目动物的烈性传染病。口蹄疫病毒有7种主要血清型;0型、A型、C型、SAT-1、SAT-2、SAT-3以及亚洲1型。我国0型、A型病毒最为常见。
在口蹄疫疫苗免疫地区,可以检测口蹄疫病毒非结构蛋白来鉴别诊断疫苗免痘和野毒感染动物。与结构蛋白不同,非结构蛋白有很高的保守性,不同血清型病毒非结构蛋白同源性很高，因此,无论何种血清型病毒感染产生的非结构蛋白抗体都相同。国际善医局(OIE)规定可以通过EITB , AGP of VIAA和ELISA方法检测非结构蛋|白抗体。本试剂盒适用于口蹄疫接种和非接种区域的口蹄疫血清学调查项目。
口蹄疫病毒3ABC抗体竞争ELISA检测试剂盒包被重组非结构蛋白,用于检测口蹄疫非结构蛋白抗体。本试剂盒可以检测任何血清型口蹄疫病毒感染产生的非结构蛋白抗体,适用于口蹄疫疫苗接种动物,也适用于非接种动物非结构蛋白抗体的检测。本试剂盒适用于猪、牛.山羊和绵羊等动物的血清检测。
主要组份与含量。
口蹄疫病毒3ABC抗原包被板：5块板
样品稀释液：100mLX1
10倍洗涤液：240mLX1
FMDV 3ABC HRP标记抗体：70mLX1
TMB底物液：70mLX1
终止液.：40mLX1
阳性对照血清：2mLX1
阴性对照血清：2mLX1
封板膜：5张
说明书：1份
注意事项
1) 试剂盒储存 条件为2-8*C.开启前应确认其批号及有效期。
2) 过期产 品请勿使用,不同批号的试剂盒组份禁止混用。
3) 试剂盒使用前各组份试剂均需恢复至室温(25±3"C),使用后放置2-8℃保存。
4)应注意 避免向试剂盒中引入污染。
5)实验所用仪器 (如:微量移液器，恒温培养箱, ELISA洗板机,酶标仪)需要在使用前进行功能检查,确保其可用性、准确性。
6) 所有试剂严禁接触皮肤和粘膜。检测结束后所用耗材需按国家规定进行无害化处理。
7)移液器吸头必须一次一换。
8)未用的微孔板条可装入密封袋中2-8°C保存。
9) 试剂盒中各组份容器只针对该组份使用,不可二次利用。
10)仅供兽医诊断使用。
用法与判定
1、试剂准备
1)所有试剂恢复至室温 (25±3°C)后使用。
2) 1倍洗 涤液的配制
10倍洗涤液使用超纯水进行10倍稀释，稀释后的洗涤液在2- 8°C可以稳定保存1周。如配制100mL 1倍洗涤液需10mL 10倍洗涤液加90ml超纯水(dH2O)。
2.样品准备
1)尽量使用新鲜采集的血清样品。
2)不能用于检测严重污染或严重溶血的样品。
3)如果血清样本浑浊,需离心后取上清进行检测。
4)检测样品可在2-8°C保存5天, 长时间保存需要转移至-20°C或更低温环境中。
3.、样品稀释及阴、阳性对照血清稀释
样品采用5倍稀释。按照下一页“微孔板加样位置示例图”在稀释板中加入120μL样品稀释液，各孔加入30μl血清样品。同样比例稀释阳性对照血清(PC)与阴性对照血清(NC) ,即:在稀释板A1、B1.C1. D1孔各加入120μL样品稀释液，A1、B1孔各加入30μL NC, C1. D1孔各加入30μL PC;充分混匀。
4.操作歩驟
1)將所有組分从武剤盒中取出,在恒温箱(25士3‘C)中放置至少60分狆,恢夏至室温。
2) 按照"微孔板加祥位雪示例圏"向抗原包被板指定孔中分別加入100uL稀釋后的祥品以及100uL稀后明性対照血清(NC)、阻性対照血清(PC。
3)盖上封板膜,室温(25±3"C)下孵育1小吋(±2分钟）。
4) 用ELISA洗板机或微量移液器洗板,弃去孔中液体,毎孔加300uL 1倍洗潦液,洗条3次。最后-次洗滌后將醇棕板在吸水紙.上軽軽拍干,声禁各歩驟之囘孔板出現干燥情况。
5)毎孔加入100uL FMDV 3ABC HRP様己抗体。
6)盖上封板膜,室温(25±3C)下孵育1小时(±2分钟〉。
7重夏歩驟4)。
8)毎孔中加入100uL TMB底物液。
9)盖上封板膜，室温(25±3*C)下孵育15分钟(±1分钟)。10)每孔中加入50μL 终止液，终止酶促反应。
11)使用450nm波 长测量吸光度值。
12)结果判定与计算。
5.判定
1)实验成立条件
阴性对照0Dsorm平均值> 0.7;
阳性对照S/N平均值<03;
如果检测结果不在界定范围则需要重新进行检测
2)计算方法
NC OD均值=（NC1+NC2）/2
3)样品S/N值计算公式
S/N=样品OD值/NC OD均值
4)判定标准
阳性：S/N≤0.5
阴性：S/N>0.6
可疑：0.5≤0.6
检测结果可疑的样品,建议再次检测
